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2020년 미국 HDT Bio (Host Directed Therapeutics Biotechnology) 사는 강력한 RNA Delivery 플랫폼인
LION™ (Lipid Iron Oxide Nanoparticles) RNA Delivery System 을 개발하였습니다.
LION™ RNA Delivery System 은 다음 내용으로 구성되어 있습니다.
| Squalene : |
Vaccine Adjuvant 기능을 하며 LION™ 의 골격을 형성하는 역할 |
| SPIO : |
Super paramagnetic Iron Oxide, Fe3O4, 양이온산화철 : 양이온을 띄고 있어 RNA 와 결합하는 기능 |
| DOTAP : |
the cationic lipid 1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium propane : RNA 와 결합하여 RNA-combined LION™ 을
매우 stable 상태로 유지시켜 주는 핵심적인 기능 |
| SPAN 60 : |
계면활성제 |
| Tween 80 : |
계면활성제 |
LION™ system 을 RNA 와 mixing 하면 RNA 가 LION™ 에 강하게 결합하여 RNA-combined LION 이 된다.
RNA-combined LION™ 의 RNA 가 어느 정도 안정하게 존재하는지 확인하기 위해 RNAse 처리하여 전기영동으로 확인한 결과
LION™ 에 combined 된 RNA 는 매우 안정한 상태를 유지하는 것을 알 수 있었다.
또한 LION™ 에 combine 된 RNA 는 온도변화에도 매우 안정한 상태를 유지하고 있는 것을 확인할 수 있었다.
LION™ formulation
LION™ formulation that SPIO nanoparticles within a hydrophobic squalene core to enhance formulation stability.
- 37.5 mg/ml squalene
- 30 mg/ml DOTAP chloride
- 37 mg/ml Span® 60
- 37 mg/ml Tween® 80
LION™ formulation 과정
| 1 |
combine the iron oxide nanoparticles with the oil phase (Squalene, Span 60, and DOTAP) |
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| 2 |
sonicate for 30 minutes in a 65°C water bath |
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| 3 |
Separately, the aqueous phase, containing Tween 80 in water, was prepared with
continuous stirring until all components were dissolved. |
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| 4 |
The oil and aqueous phases were then mixed and emulsified using mixer |
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| 5 |
the crude colloid was subsequently processed by passaging through a microfluidizer
at 20,000 psi with a LM10 microfluidizer equipped with a H10Z-100 μm ceramic
interaction chamber (Microfluidics) until the z-average hydrodynamic diameter
- reached 50 ±5 nm with a 0.2 polydispersity index. |
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| 6 |
The microfluidized LION™ was terminally filtered with a 200 nm pore-size polyethersulfone
(PES) filter and stored at 2-8°C |
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| 7 |
Replicon RNA was complexed with LION™ formulations and placed on ice for 30 min |
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LION™ RNA Delivery Platform 특징
| - |
매우 많은 양의 target 단백질을 생성하여 빠른 면역 또는 치료 작용을 기대 (~50배) |
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| - |
인체내에서 매우 안정하다, |
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| - |
면역보강제 (vaccine adjuvant) 가 포함되어 있다. |
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| - |
상온 보관이 가능 |
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가격이 저렴 |
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| - |
제조가 매우편리하다 |
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LION™ RNA Delivery System 을 이용하여 COVID-19 mRNA Vaccine 을 만드는 과정은 HDT Bio 사의 Chief Scientific Officier 인 Dr. Darrick Carter 가 진행하는 아래 세미나 동영상을 참조하십시요.
그리고 LION™ RNA Delivery System 관련 자세한 내용은 다음 사이트를 참조하십시요.
- bioRxiv
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※ 이 화면을 click 하시면 Youtube 동영상으로 이동됩니다. |
이 발표는 다음과 같은 내용으로 이루어 져 있습니다.
- Overview of RNA from discovery to approval of an mRNA vaccine in 2020
- LNPs, CNEs and LION™ - The limitations and advantages of major delivery systems
in use for RNA
- How self-amplifying RNAs work
- Vaccine results with LION™, a next generation RNA delivery system
- Future uses of mRNA Technology for medical breakthroughs
- Cost consideration for scale-up
- Using Microfluidizer® processors in manufacturing for global commercial distribution |
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