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Instruction

Classical Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 cell culture medium (CCM) 은 대표적인 mammalian cell cultures 용 배지입니다. 이러한 CCM 성분 분석을 하면 여러가지 정보를 알 수 있는데 아직 사용 전의 신선한 배지에 대한 정보뿐만 아니라 사용된 배지에서 어떤 영양소가 고갈되었는지, 세포 배양을 통해 발생한 대사산물 (부산물) 은 어떤 종류가 있으며 그 양은 어떠한지 등을 알 수 있습니다.

따라서 배지 성분 분석은 다양한 종류를 동시 다발적으로 분석하는 포괄적 진행이 필요하며 시시각각 변하는 성분 종류와 그 양을 모니터링 하기 위하여 빈번하게 측정해야 합니다.

이러한 관점에서 REBEL™ at-line 배지 성분 분석기는 가장 최적의 장비입니다. 이 분석기는 샘플 당 최대 10분이 소요되어 분석 시간이 매우 짧습니다. 또한 간단한 세포 제거 과정과 전용 키트를 이용한 희석액 제조 등 전처리 과정이 간단합니다.


Experiment

총 3대의 REBEL 분석기를 사용하여 샘플을 20번 반복하여 측정했습니다. 측정된 아미노산 농도를 RPMI 1640 제조사에서 제공하는 성분분석표와 비교했습니다. 측정 전에는 모두 전용 키트를 이용하여 10배 희석했습니다. 결과는 그림1과 같습니다.



Figure 1 : CCM RPMI 1640 analysis on three REBEL devices with 20 replicate measurements per device. Analyte recovery was calculated by comparing the measured amino acid concentration to the published classical RPMI 1640 formulation concentration. This graph shows measurement accuracy with ±20% analyte recovery highlighted with grey background, and reproducibility as error bars with %RSD values at the base of the column.


Discussion

배지 제조사에서 제공하는 성분 분석표를 기준하여 실제로 반복 분석한 측정값을 그래프화 하였습니다. 회색 배경은 실제 측정값의 평균에서 ±20% 오차 범위를 나타냅니다.

그래프에서 확인할 수 있듯이 RPMI 1640 CCM 를 3대의 REBEL 을 이용하여 분석한 결과 매우 재현성이 뛰어남을 알 수 있습니다. 따라서 REBEL 측정은 신뢰할 수 있는 결과를 제공하며 측정 시간 또한 10분 내외로 신속하여 다량의 샘플을 단시간에 분석할 수 있습니다.






 
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