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BACKGROUND
Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM), Iscove’s Modified Dulbecco’s Medium (IMDM) 그리고 Roswell Park Memorial Institute media (RPMI) 는
세포배양 공정에 가장 많이 사용되는 media formulation 이다. 이러한 chemically-defined media 들은 protein-free 이며 주성분은 amino acids, vitamins, minerals 이고
세포주의 영양 요구특성에 따라 다른 성분을 추가하기도 한다. stem cells, T and B cells, fibroblasts, hybridomas, HEK293, leukemia cells, plant cells, insect cell 과 같은 특이 세포배양공정에서는
fetal bovine serum (FBS) at 10% v/v 를 추가로 넣어주기도 한다.
FBS 를 추가하는 것은 proteins, lipids 그리고 growth factors 들을 보충하여 주어 cell viability 와 growth 를 유지시키고 또한 pH, temperature, osmolality 에 대한 배양액의 대응 능력을 향상시키는 목적이다.
그러나 FBS supplemented media 를 사용하면 세포가 생산한 protein 을 분리하는데 큰 문제점을 야기시킬 수 있다.
THE EXPERIMENT
DMEM, IMDM, and RPMI media 와 10% FBS 가 첨가된 DMEM, IMDM, and RPMI media 총 6개의 샘플에 있는 성분의 함량을 분석하였다.
Figure 1 : Media component concentrations from basal media without and with 10% FBS supplementation. Error bars are from the standard deviation of n = 5 replicates
DISCUSSION
① FBS adding 여부와 상관없이 4개 media 의 성분 함량에는 큰 차이가 없었다.
② DMEM media 의 경우 10% serum supplementation 하게되면 Ala, Glu, and Pro 의 함량이 다른 media 보다 적었다
③ IMDM media 의 경우 10% FBS 추가에 상관없이 성분 함량에는 큰 변화가 없었다.
④ RPMI media 에는 Ala 이 없었으나 10% FBS 를 추가하게 되면 Ala 이 확인되는데 이는 FBS 에는 적은 함량의 Ala 이 존재하지만 serum-supplemented media 에는 충분한 함량이 된다는 것을 의미한다.
이 결과에서 우리는 chemically-defined media 에 serum 을 보충하였을 때 REBEL 을 이용하여 media formulation 의 변화를 확인하여 재현성 있는 세포배양을 할 수 있다는 것을 알 수 있다.
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