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ISO 16472:2006 Animal feeding stuffs - Determination of amylase-treated Neutral Detergent Fibre content (aNDF)
AOAC 2002.04 Amylase-treated Neutral Detergent Fibre in Feeds
Tested with VELP Scientifica FIWE Advance Fiber AutoExtractor (Code F30500500). |
Introduction
사료의 필수 영양소 함량은 사료의 품질 및 동물의 이용 가능성과 직접적으로 연관되어 있다..
Neutral Detergent Fiber (NDF)의 본질적인 개념은 식물 세포가 소화가 잘 되지 않는 hemicellulose, cellulose 및 lignin으로 구성된 세포벽과 소화가 잘 되는
당, 전분 등을 함유한 기타 세포 구성 성분으로 나눌 수 있다는 것이다. Hemicellulose, cellulose 및 lignin은 non-ruminants에서 소화되지 않는 반면,
Hemicellulose, cellulose는 ruminants에서 부분적으로 소화될 수 있다. NDF는 bulk 섬유질의 좋은 지표이며 사료 섭취량, 즉 동물이 하루 표준 섭취량 예측에 사용되었다.
Amylase-treated NDF (aNDF) 방법은 사료의 총 불용성 섬유를 측정하기 위해 개발되었다.
VELP FIWE Advance Fiber AutoExtractor의 성능은 BIPEA에서 주최한 proficiency testing program으로 평가되었다. FIWE Advance Fiber 분석기를 사용하여 샘플을
분석한 결과를 BIPEA 허용 범위와 비교했다
Determination of NDF content in Triticale feed and Dehydrated alfalfa feed
FIWE Advance 분석기를 사용한 aNDF 분석은 완전 무인 작업으로 다음과 같은 3단계로 요약할 수 있다.
BOILING & FILTERING (DIGESTION) 동안 사료 샘플은 heat-stable α-amylase-treated enzyme이 첨가된 Neutral Detergent Solution NDS로 끓여 neutral detergent에 용해 가능한 당, 전분 및 soluble pectin 등
성분을 불용성 세포벽 물질, hemicellulose, cellulose, lignin 등 성분으로부터 분리한다. 세포벽에 둘러 싸인 내용물의 약 98%는 소화가 잘되며 다양한 당, 전분, pectin 및
기타 가용성 탄수화물, 단백질, 비단백질 질소 화합물, 지질, 수용성 미네랄 및 비타민을 포함한다.
WASHING하는 동안 crucible에 남은 잔여물을 물로 세척하여 detergent residues를 제거한다. 마지막 단계는 샘플의 DEFATTING이고 이 단계에서의 마지막 세척은 아세톤으로 수행된다.
BIPEA Samples
| Triticale |
ID : 6-3813-0027 |
NDF assigned value: 12.6 % |
Tolerance range : 11.1 - 14.1 % |
| Dehydrated alfalfa |
ID : 8-1413-0195 |
NDF assigned value : 38.8 % |
Tolerance range : 36.8 - 40.8 % |
Chemicals and Equipment required
1. Analytical balance, 4 decimals
2. Glass Crucibles P2, 6pcs (A00000140)
3. Neutral detergent solution NDS.
4. Heat-stable alpha-amylase, as a solution or a water extract of lyophilized enzyme powder (approx. 1 g of powder extracted in 100 ml of water).
5. Sodium sulfite anhydrous (Na2SO3)
6. Acetone, technical grade
Crucibles Preparation
VELP barcode reader (Barcode scanner with USB socket Code: A00000364 or Wireless barcode scanner Code: A00000365)를 FIWE Advance에 연결한다.
Analysis/Details를 선택 후 crucible를 스캔하고 0.5g의 샘플을 측정하여 각 crucible (Msample)에 넣고 측정된 Msample 값을 저울에서 FIWE Advance로 전송한다.
그리고 Sodium sulfite anhydrous 0.5g을 준비한다.
이 작업은 모든 샘플에 대해 순차적으로 반복으로 진행된다. 2개의 blank를 포함한 20~30개의 샘플을 분석한다.
Analysis with FIWE Advance
ControlPad에서 분석을 선택한 후 아래와 같은 내용의 parameter를 포함하는 NDF - Neutral detergent fiber (Van Soest) 분석법을 선택한다.
- Crucibles porosity : P2
- Preheat : No
- NDS : 50 ml
- Octanol : Yes
- Enzyme : Yes
- Digestion time : 60 minutes
- Washing : 50 ml of distilled water for 3 times
Lower the lever and position the heating shield.
- START를 눌러 분석을 시작한다.
- 분석이 끝나면 crucible를 COEX 장치에 옮겨 25ml 아세톤으로 3회 filtering하여 지방을 제거한다.
- 130°C ± 2°C 오븐에서 2시간 건조한 후 desiccator에서 냉각한다
- 결과 메뉴에서 분석 완료된 crucible ID를 선택하고 계산을 누른 후 barcode reader로 crucible를 스캔하고나서 0,0001g (Mdry 및 Bdry)까지 무게를 측정한다.
- 525 ± 15°C의 muffle에서 잔류물이 담긴 crucible을 최소 3시간 동안 또는 탄소가 없어질 때까지 가열한 후 desiccator에서 냉각한다
- 결과 메뉴에서 분석 완료된 crucible ID를 선택하고 계산을 누른 후 barcode reader로 crucible를 스캔하고나서 0,0001g (Mash 및 Bash)까지 무게를 측정한다
Results on Triticale feed and Dehydrated alfalfa feed
aNDF %= (Mdry - Mash - (Bdry-Bash)) *100/Msample
Mdry = sample weight after drying
Mash = sample weight after ashing
Msample = sample weight
Bdry = blank weight after drying
Bash = blank weight after ashing
Conclusion
- 결과는 아주 낮은 상대 표준 편차로 뢰할 수 있고 예상 값과 유사하다
- (RSD ≤ 1%), 이는 결과의 높은 재현성을 의미한다
- 신뢰성 높은 분석기인 FIWE Advance 장치를 사용하면 분석 조건을 아주 쉽게 표준화할 수 있다
Benefits of FIWE Advance are :
① 6개의 샘플을 동시에 완전 자동으로 분석
② 7인치 터치 스크린으로 간편하게 사전 설정된 표준 방법 선택 또는 사용자 정의 방법 설정
③ 모든 시약의 자동 주입과 가열로 화학 물질 및 유해 가스와의 접촉을 방지
④ 최첨단 안전 기능으로 분석의 모든 단계를 제어
⑤ ± 1% 이상의 RSD로 높은 재현성과 정밀한 분석 결과
⑥ 공식적인 분석 절차에 따라 결과를 획득
⑦ ELP Ermes cloud platform에 연결하여 언제 어디서나 기기를 모니터링 및 제어하고 database에 연결 가능하다.
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